RÉSUMÉ ET EXPLICATION LE TEST
Le paludisme est une maladie fébrile, hémolytique et transmise par les moustiques qui infecte plus de 200 millions de personnes et tue plus d'un million de personnes par an.Elle est causée par quatre espèces de Plasmodium : P. falciparum, P. vivax, P. ovale et P. malariae.Ces plasmodes infectent et détruisent tous les érythrocytes humains, provoquant des frissons, de la fièvre, de l'anémie et une splénomégalie.P. falciparum provoque une maladie plus grave que les autres espèces plasmodiales et est responsable de la plupart des décès dus au paludisme.P. falciparum et P. vivax sont les agents pathogènes les plus courants, cependant, il existe une variation géographique considérable dans la distribution des espèces.
Traditionnellement, le paludisme est diagnostiqué par la mise en évidence des organismes sur des frottis épais de sang périphérique colorés au Giemsa, et les différentes espèces de plasmodium se distinguent par leur apparition dans les érythrocytes infectés.La technique est capable d'établir un diagnostic précis et fiable, mais uniquement lorsqu'elle est effectuée par des microscopistes qualifiés utilisant des protocoles définis, ce qui présente des obstacles majeurs pour les régions reculées et pauvres du monde.
Le test rapide Malaria Pf/Pv Ag est développé pour résoudre ces obstacles.Il utilise des anticorps spécifiques à P. falciparum Histidine Rich Protein-II (pHRP-II) et à P. vivax Lactate Dehydrogenase (Pv-LDH) pour détecter et différencier simultanément l'infection par P. falciparum et P. vivax.Le test peut être effectué par du personnel non formé ou peu qualifié, sans équipement de laboratoire
PRINCIPE
Le test rapide Malaria Pf/Pv Ag est un test immunologique par chromatographie à flux latéral.Les composants du test de la bandelette consistent en : 1) un tampon conjugué de couleur bordeaux contenant un anticorps de souris anti-Pv-LDH conjugué à de l'or colloïdal (conjugués Pv-LDH-or) et un anticorps de souris anti-pHRP-II conjugué à de l'or colloïdal (conjugués pHHRP-II-or), 2) une bandelette de membrane de nitrocellulose contenant deux bandes de test (bandes Pv et Pf) et une bande de contrôle (bande C).La bande Pv est pré-revêtue d'un autre anticorps spécifique anti-Pv-LDH de souris pour la détection de l'infection Pv, la bande Pf est pré-revêtue d'anticorps polyclonaux anti-pHRP-II pour la détection de l'infection Pf, et la bande C est recouverte d'IgG anti-souris de chèvre.
Pendant le test, un volume adéquat de l'échantillon de sang est distribué dans le puits d'échantillon (S) de la cassette de test, un tampon de lyse est ajouté au puits de tampon (B).Le tampon contient un détergent qui lyse les globules rouges et libère divers antigènes qui migrent par capillarité à travers la bandelette contenue dans la cassette.Si la Pv-LDH est présente dans l'échantillon, elle se liera aux conjugués Pv-LDH-or.L'immunocomplexe est ensuite capturé sur la membrane par l'anticorps anti-Pv-LDH pré-enrobé, formant une bande Pv de couleur bordeaux, indiquant un résultat de test Pv positif.Alternativement, pHRP-II, s'il est présent dans l'échantillon, se liera aux conjugués pHRP-II-or.L'immunocomplexe est ensuite capturé sur la membrane par les anticorps anti-pHRP-II pré-enrobés, formant une bande Pf de couleur bordeaux, indiquant un résultat de test positif Pf.L'absence de bandes de test suggère un résultat négatif.Le test contient un contrôle interne (bande C) qui doit présenter une bande de couleur bordeaux de l'immunocomplexe de conjugués chèvre anti-IgG de souris / IgG de souris (anti-Pv-LDH et anti-pHRPII)-or, quel que soit le développement de la couleur sur l'une des bandes de test.Sinon, le résultat du test est invalide et l'échantillon doit être retesté avec un autre appareil.
