RÉSUMÉ ET EXPLICATION LE TEST
Le paludisme est une maladie fébrile, hémolytique et transmise par les moustiques qui infecte plus de 200 millions de personnes et tue plus d'un million de personnes par an.Elle est causée par quatre espèces de Plasmodium : P. falciparum, P. vivax, P. ovale et P. malariae.Ces plasmodes infectent et détruisent tous les érythrocytes humains, provoquant des frissons, de la fièvre, de l'anémie et une splénomégalie.P. falciparum provoque une maladie plus grave que les autres espèces plasmodiales et est responsable de la plupart des décès dus au paludisme.P. falciparum et P. vivax sont les agents pathogènes les plus courants, cependant, il existe une variation géographique considérable dans la distribution des espèces.
Traditionnellement, le paludisme est diagnostiqué par la mise en évidence des organismes sur des frottis épais de sang périphérique colorés au Giemsa, et les différentes espèces de plasmodium se distinguent par leur apparition dans les érythrocytes infectés1.La technique est capable d'établir un diagnostic précis et fiable, mais uniquement lorsqu'elle est effectuée par des microscopistes qualifiés utilisant des protocoles définis2, ce qui présente des obstacles majeurs pour les régions reculées et pauvres du monde.
Le kit de test rapide Malaria Pf / Pan Antigen est développé pour résoudre ces obstacles.Le test utilise une paire d'anticorps monoclonaux et polyclonaux contre la protéine spécifique de P. falciparum, la protéine de répétition d'histidine II (pHRP-II), et une paire d'anticorps monoclonaux contre la lactate déshydrogénase de plasmodium (pLDH), une protéine produite par les quatre espèces de plasmodium, permettant ainsi la détection et la différenciation simultanées de l'infection par P. falciparum et/ou l'un des trois autres plasmodes.Elle peut être réalisée par du personnel non formé ou peu qualifié, sans équipement de laboratoire.
PRINCIPE
Le kit de test rapide Pf/Pan Malaria est un immunodosage par chromatographie à flux latéral.Les composants de la bandelette de test consistent en : 1) un tampon conjugué de couleur bordeaux contenant un anticorps de souris anti-pHRP-II conjugué à de l'or colloïde (conjugués pHHRP II-or) et un anticorps de souris anti-pLDH conjugué à de l'or colloïde (conjugués pLDH-or),
2) une bandelette de membrane de nitrocellulose contenant deux bandes test (bandes Pan et Pv) et une bande contrôle (bande C).La bande Pan est pré-enduite d'anticorps monoclonal anti-pLDH par lequel l'infection par l'une des quatre espèces de plasmodes peut être détectée, la bande Pf est pré-enduite d'anticorps polyclonaux anti-pHRP-II pour la détection de l'infection Pf, et la bande C est enduite d'IgG anti-souris de chèvre.
Pendant le test, un volume adéquat de l'échantillon de sang est distribué dans le puits d'échantillon (S) de la cassette de test, un tampon de lyse est ajouté au puits de tampon (B).Le tampon contient un détergent qui lyse les globules rouges et libère divers antigènes plasmodiques, qui migrent par capillarité à travers la bandelette contenue dans la cassette.Le pHRP-II, s'il est présent dans l'échantillon, se lie aux conjugués pHRP II-or.L'immunocomplexe est ensuite capturé sur la membrane par les anticorps anti-pHRPII pré-enrobés, formant une bande Pf de couleur bordeaux, indiquant un résultat de test positif Pf.pLDH, s'il est présent dans l'échantillon, se lie aux conjugués d'or pLDH.L'immunocomplexe est ensuite capturé sur la membrane par l'anticorps anti pLDH pré-enrobé, formant une bande Pan de couleur bordeaux, indiquant un résultat de test positif au plasmodium.En l'absence de bande Pan, un résultat de test positif pour l'un des trois autres plasmodes peut être recommandé.
L'absence de bandes de test (Pan et Pf) suggère un résultat négatif.Le test contient un contrôle interne (bande C) qui doit présenter une bande de couleur bordeaux de l'immunocomplexe d'IgG anti-souris de chèvre / IgG de souris (conjugués pHHRP-II et pLDH-or) quel que soit le développement de la couleur sur l'une des bandes de test.Sinon, le résultat du test est invalide et l'échantillon doit être retesté avec un autre appareil.
